當前位置：三日瘧原蟲LAMP試劑盒檢測程序
點擊次數：790 更新時間：2021-01-12
三日瘧原蟲LAMP試劑盒檢測程序：
. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 00ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 20 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液0 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液00ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液00ul ，置 37 ℃ 暗處反應5 分鐘。
8. 每孔加入00ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
操作步驟：
：樣品準備：取毫升細胞培養上清（貼壁和懸浮細胞都可以,*已培養48小時以上），在6000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無菌PBS重懸，在6000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復用無菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用00微升超純水重懸，置于00℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存到2個月。
2：PCR反應的準備：
待各組份融化后先瞬時離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應體系，每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照，測試反應管可以有多個。配制過程中應注意無菌，戴，并注意避免操作產生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，在有風壓的設備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。
